技术原理

生物膜干涉技术(Bio-Layer Interferometry, BLI)基于白光干涉核心原理,通过光纤生物传感器实现分子互作的实时无标记检测。宽谱白光经光纤传导至传感器尖端,在传感器表面的光学膜层与内部参考层分别发生反射,两束反射光因光程差形成干涉光谱。

当溶液中的分析物与传感器表面固定的配体发生特异性结合时,生物膜层厚度发生纳米级变化,导致干涉光谱的特征波长产生偏移(Δλ);反之,分子解离时膜层厚度减小,波长偏移随之恢复。仪器实时记录波长偏移量随时间的变化,生成传感图谱(Sensorgram),精准计算结合速率常数(ka)、解离速率常数(kd)及平衡解离常数(KD)。

核心优势

  • 高通量高效:单次可完成多样品、多浓度检测,实验效率较传统技术提升5-10倍
  • 兼容性极强:无需样品纯化,可直接在细胞裂解液、血清等复杂体系中检测
  • 无标记实时:无需荧光或同位素标记,避免标记对分子活性的影响
  • 低成本易操作:设备维护简单,传感器可重复使用,操作流程标准化

应用场景

  1. 抗体-抗原互作:抗体亲和力成熟、表位分组、特异性验证
  2. 蛋白-小分子互作:药物筛选、靶点验证、先导化合物优化
  3. 蛋白-蛋白互作:复合物组装、信号通路机制、蛋白功能验证
  4. 蛋白-核酸互作:转录调控、RNA结合蛋白研究、基因编辑机制
BLI生物膜干涉

BLI生物膜干涉技术示意图

文献解读

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